產(chǎn)品詳情
簡單介紹：
HIT-T15細胞ATCC CRL-1777
詳情介紹：
HIT-T15細胞ATCC CRL-1777標準細胞株基本信息
| 出品公司: | ATCC |
|---|---|
| 細胞名稱: | HIT-T15細胞, ATCC CRL-1777, HIT-T15, 倉鼠胰島β細胞 |
| 細胞又名： | HIT T15; HIT.T15; HIT T-15; HITT15; HIT clone T15; Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15; HIT |
| 種屬來源: |
倉鼠Mesocricetus auratus (hamster, Syrian golden)
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| 組織來源: | 胰腺；β細胞 |
| 細胞特征： |
This line was established from a primary culture of Syrian hamster islet cells which were transformed with SV40.該細胞成團生長，呈島嶼狀。
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| 細胞形態(tài): | 上皮樣 |
| 生長特性: | 貼壁生長 |
| 培養(yǎng)基: | MEM培養(yǎng)基(MEM，GIBCO，貨號41500034)，90%；FBS，10%。 |
| 產(chǎn)品目錄號: | CRL-1777 |
| 其他保藏庫編號: | ATCC |
| 培養(yǎng)基: | MH培養(yǎng)基, TSB培養(yǎng)基 |
| 生長條件: | 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37 ℃, |
| 傳代方法: | 1：2至1：6，每周2次。 |
| 凍存條件: | 90% 完全培養(yǎng)基+10% FBS，液氮儲存 |
| 支原體檢測: | 陰性 |
| **等級: | 1 |
| 應用: | 該細胞可以作為轉(zhuǎn)染宿主細胞。 |
| STR: |
Amelogenin: X,Y
CSF1PO: 10,11
D13S317: 9,13
D16S539: 12,13
D5S818: 11,12
D7S820: 10
THO1: 9
TPOX: 8,9
vWA: 17
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| 參考文獻: |
Knowles BB, et al. Human hepatocellular carcinoma cell lines secrete the major plasma proteins and hepatitis B surface antigen. Science 209: 497-499, 1980. PubMed: 6248960
Knowles BB, Aden DP. Human hepatoma derived cell line, process for preparation thereof, and uses therefor. US Patent 4,393,133 dated Jul 12 1983
Schardt C, et al. Characterization of insulin-like growth factor II receptors in human small cell lung cancer cell lines. Exp. Cell Res. 204: 22-29, 1993. PubMed: 8380141
Aden DP, et al. Controlled synthesis of HBsAg in a differentiated human liver carcinoma- derived cell line. Nature 282: 615-616, 1979. PubMed: 233137
Busch SJ, et al. Differential regulation of hepatic triglyceride lipase and 3-hydroxy-3- methylglutaryl-CoA reductase gene expression in a human hepatoma cell line, HepG2. J. Biol. Chem. 265: 22474-22479, 1990. PubMed: 2176219
Darlington GJ, et al. Growth and hepatospecific gene expression of human hepatoma cells in a defined medium. In Vitro Cell. Dev. Biol. 23: 349-354, 1987. PubMed: 3034851
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| 細胞圖片: |
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HIT-T15細胞ATCC CRL-1777細胞特點和簡介
該細胞來源于一名15歲的白人少年的肝癌組織。該細胞表達甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、結(jié)合珠蛋白、銅藍蛋白、纖溶酶原、補體C4、C3激活物、纖維蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、視黃醇結(jié)合蛋白；表達胰島素受體和胰島素樣生長因子IGFⅡ的受體；該細胞具有3-羥基-3-甲酰輔酶A還原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未證明該細胞中有HBV基因組。
HIT-T15細胞ATCC CRL-1777細胞接受后處理
1) 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4) 如果細胞密度達80%-90%請及時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5) 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
HIT-T15細胞ATCC CRL-1777細胞培養(yǎng)操作
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。**天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
HIT-T15細胞ATCC CRL-1777細胞培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問 題，責任由客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng)，待細 胞匯合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞 傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和 Procell 技術(shù) 部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián) 系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。