出品公司:	ATCC
細(xì)胞名稱:	6T-CEM細(xì)胞, ATCC CRL-8296細(xì)胞, 6TCEM細(xì)胞, 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞
細(xì)胞又名:	6-T CEM
種屬來源:	人
組織來源:	T淋巴細(xì)胞
疾病特征:	急性淋巴細(xì)胞白血病
細(xì)胞形態(tài):	淋巴母細(xì)胞
生長特性:	懸浮生長
培養(yǎng)基:	RPMI-1640(GIBCO,貨號31800022)，90%；FBS，10%。
產(chǎn)品目錄號:	CRL-8296
生長條件:	氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37  ℃,
傳代方法:	1：2至1：6，每周2次。
凍存條件:	90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO，液氮儲存
支原體檢測:	陰性
**等級:	2
參考文獻(xiàn):	Lau CY. Treatment of autoimmune diseases such as rheumatoid arthritis with suppressor factor. US Patent 4,705,687 dated Nov 10 1987

6T-CEM細(xì)胞ATCC CRL-8296人T細(xì)胞白血病細(xì)胞特點和簡介

這是一個CCRF-CEM的6-硫鳥嘌呤抗性變種。 HPRT, HGPRT缺陷并能分泌高滴度的免疫抑制因子。 通常用作T細(xì)胞雜交瘤的融合對象。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過STR檢測。

6T-CEM細(xì)胞ATCC CRL-8296人T細(xì)胞白血病細(xì)胞接受后處理

1) 收到細(xì)胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
  2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長 狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
  3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
  4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請及 時進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng) 基。
  5) 接到細(xì)胞次日，請檢查細(xì)胞是 否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián) 系。
 

6T-CEM細(xì)胞ATCC CRL-8296人T細(xì)胞白血病細(xì)胞培養(yǎng)操作

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然 后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng) 過夜）。**天換液并 檢查細(xì)胞密度。
  2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。        1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
       2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶 中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落 ，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。      
     3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
       4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中 或者瓶中。
  3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
        1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
        2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞， 根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍 存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
       3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時 以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

6T-CEM細(xì)胞ATCC CRL-8296人T細(xì)胞白血病細(xì)胞培養(yǎng)注意事項

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述 現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。
  2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、 所 需細(xì)胞因子 等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題，責(zé)任由客戶 自行承擔(dān)。
  3.   用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細(xì) 胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均 會貼 壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán) 染色測定細(xì)胞活力，如果證實細(xì)胞活力正常， 請將細(xì)胞離心后用新鮮 培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)?您再免費寄送一次。
  4.   靜置細(xì)胞貼壁后，請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培 養(yǎng)，待細(xì) 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。
  5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì) 胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
  6.   建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 Procell 技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián) 系 ，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
  7.該細(xì)胞僅供科研使用。