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產(chǎn)品詳情
簡(jiǎn)單介紹：
Sure
詳情介紹：
感受態(tài)細(xì)胞基本信息
| 出品公司: | Stratagene |
|---|---|
| 感受態(tài)細(xì)胞名稱: | Sure感受態(tài)細(xì)胞 |
| 菌株類型: | E.coli |
| 產(chǎn)品目錄號(hào): | 200238 |
| 培養(yǎng)基: | LB培養(yǎng)基 |
| 生長(zhǎng)條件: | 37 ℃, 有氧 |
| 基因型: |
 |
| 抗性: | 卡那，四環(huán)素 |
| 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化條件: | 42 ℃熱激 |
| 應(yīng)用: | 克隆菌株 |
| 誘導(dǎo)方法: | -- |
| 菌株特點(diǎn): |
SURE（Stop Unwanted Rearrangement Events）感受態(tài)細(xì)胞是設(shè)計(jì)用來克隆在傳統(tǒng)菌株中無法克隆的DNA片段序列的菌株。SURE感受態(tài)菌株缺乏催化重組和刪除非標(biāo)準(zhǔn)二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)， 例如十字形（由反向重復(fù)序列導(dǎo)致）和Z字形的DNA序列的組件。這些非標(biāo)準(zhǔn)二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)在真核細(xì)胞中經(jīng)常出現(xiàn)，而且這些結(jié)構(gòu)能夠阻礙真核細(xì)胞DNA 在傳統(tǒng)菌株中的克隆。sure感受態(tài)細(xì)胞是限制性內(nèi)切酶陰性的(McrA-, McrCB-, McrF-, Mrr-, HsdR-)，核酸內(nèi)切酶（endA）缺陷，和重組酶(recB recJ)缺陷的。同時(shí)sure感受態(tài)細(xì)胞中所具有的F´ 游離基因上面的lacIqZΔM15基因，使得能夠利用藍(lán)白斑進(jìn)行克隆篩選。 SURE感受態(tài)細(xì)胞主要是用來克隆不穩(wěn)定DNA結(jié)構(gòu)， 大腸桿菌DNA修復(fù)系統(tǒng)會(huì)針對(duì)重復(fù)序列、二級(jí)結(jié)構(gòu)（如Z-DNA）等真核DNA進(jìn)行重排或刪除修飾。SURE感受態(tài)細(xì)胞針對(duì)uvrC,umuC,SbcC 和RecJ等參與修飾的大腸桿菌基因或蛋白進(jìn)行突變，提高了真核來源、不規(guī)則DNA的穩(wěn)定性達(dá)20倍以上，并且適合克隆甲基化DNA。 本身具有Kana和Tet抗性。當(dāng)轉(zhuǎn)化氯霉素抗性質(zhì)粒到sure感受態(tài)細(xì)胞中時(shí)，一定要用100 ug/ml的氯霉素平板去篩選。因?yàn)閟ure感受態(tài)細(xì)胞在40ug/ul的氯霉素條件下具有抗性，而對(duì)于100ug/ul的氯霉素抗生素具有敏感性。 sure感受態(tài)細(xì)胞可以用于藍(lán)白斑篩選，具有l(wèi)az互補(bǔ)基因。 在載體構(gòu)建過程中，我們經(jīng)常會(huì)遇到一些基因片段具有高度的重復(fù)，這導(dǎo)致插入載體中的序列可能會(huì)在細(xì)菌擴(kuò)增中不穩(wěn)定，在質(zhì)粒擴(kuò)增中產(chǎn)生形成片段的缺失和重排，如發(fā)現(xiàn)插入片段高頻率地產(chǎn)生缺失和重排，可以嘗試使用重組缺陷大腸桿菌菌株，例如sure感受態(tài)細(xì)胞。 |